サイトカイン刺激による接着分子の遺伝子発現に対する全身麻酔薬とずり応力の影響

1.研究目的 血管内皮上の接着分子(E-セレクチン)は好中球・単球との接着の第一段階であるローリングに関与するとされる。本研究の目的は、E-セレクチン発現に対する麻酔薬の影響を機能的レベル、蛋白レベル及びmRNAレベルで明らかにすることである。2.研究方法・研究成果 静脈麻酔薬ケタミンとプロポフォールについて検討した。ヒト臍帯静脈内皮細胞培養キットを使用し、5%CO_2,95%air,37℃で培養し,コンフルエントとなったものを用いた。ケタミン(0,10,100,1000μM)もしくはプロポフォール(0,0.01,0.1,1,10,100μg/ml)を含む培地で2時間pre-incubation後、更にIL-1(5U/ml)にて4時間刺激し、培地上清を検体として回収した。可溶性E-セレクチンの定量はELISA法により測定した。また同様の実験系で細胞を可溶化し回収しNorthern blottingによりE-セレクチンmRNA量を定量し解析した。可溶性E-セレクチン濃度はIL-1刺激により有意に増加し、ケタミンの前処置はその刺激効果を有意に抑制した。一方プロポフォールの前処置はIL-1の刺激効果に対して有意な変化はなかった。E-セレクチンmRNAはIL-1刺激により有意に増加し、ケタミンの前処置によりその効果は有意に抑制された。一方プロポフォールの前処置はその刺激効果に対して有意な変化はなかった。ケタミンには接着分子E-セレクチンの発現抑制作用があり、SIRS進展に対する予防的効果がある可能性が示唆された。3.今後の展開 現在吸入麻酔薬イソフルランとセボフルランについて、ずり応力負荷装置により30dyn/cm2のずり応力を負荷した培養細胞にて上記と同様の実験を行い検討中である。更に、同様の流れのある条件下でadhesion assayにより機能的解析を進める予定である。